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酵母蛋白抽提試劑盒的注意事項有哪些?
更新時間:2015-08-18
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1、*次使用
酵母蛋白抽提試劑盒
前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液。
2、溶液YP1在使用前先加入RNaseA,將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入,混勻,置于2-8℃保存。
3、質粒得率與酵母菌株、質粒拷貝數、培養條件等因素有關。通常酵母質粒拷貝數都很低,
酵母蛋白抽提試劑盒
一般通過電泳或分光光度計法都很難檢測到,可通過PCR 或轉化大腸桿菌來檢測。
4、使用前請先檢查溶液YP2和溶液YP3是否出現混濁,如有混濁現象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。
5、得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
6、洗脫緩沖液體積不應少于50ul ,體積過小影響回收效率;洗脫液的 pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH 值在8.0左右,可用NaOH 將水的pH 值調至此范圍,pH 值低于7.0會降低洗脫效率;
酵母蛋白抽提試劑盒
在DNA產物應保存在-20℃,以防 DNA降解。這種方法針對雙向電泳,雜質少,離子濃度小的特點!當然單向電泳也同樣適用,只是電泳的條帶會減少。
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